Infekcja Salmonella odporna na ceftriakson pozyskiwany przez dziecko z bydła cd

Plazmidy kodowane przez Escherichia coli V517,24 R1,25 i PDK9 (kolekcja szczepów CDC) stosowano jako standardy wielkości. Plazmidowy DNA ze wszystkich badanych szczepów izolowano przy użyciu zestawu (Qiagen midi-preps, Qiagen, Valencia, CA) lub zmodyfikowanej procedury lizy alkalicznej.26 Badania nad transkonjugacją
Izolat od dziecka, jednego z izolatów bydła (izolat bydła 1) i izolatu DT104 (który jest odporny na ampicylinę i podatny na kwas nalidyksowy) transfekowano E. coli C600N 27, który jest odporny na kwas nalidyksowy i jest wrażliwy. do ampicyliny, z zastosowaniem standardowych metod.28 DT104 był transskoniugowany z C600N, aby służyć jako kontrola negatywna .29
Ogniskowanie izoelektryczne
Ogniskowanie izoelektryczne przeprowadzono zgodnie z metodą Mathew i wsp. 30 w 10 ° C (aparat Multiphor, Pharmacia LKB, Uppsala, Szwecja) z przygotowanymi płytkami z poliakryloamidu (zakres pH, 3,5 do 9,5) (Pharmacia). Jako wzorzec zastosowano .-laktamazy TEM-1, TEM-2, K1, SHV-1 i P99.
Amplifikacja, sekwencjonowanie i hybrydyzacja
Startery do reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), które zostały użyte do identyfikacji genu ampC z Citrobacter freundii i sekwencji związanych z TEM zostały opisane poprzednio.28,31 Analizowano sekwencję obu nici. Hybrydyzację Southern przeprowadzono zgodnie ze standardowymi metodami32 za pomocą sond DNA znakowanych trifosforanem digoksygeniny-11-deoksyurydyny (Roche).
Wyniki
Podatność na antybiotyki, serotypy i typy fagowe izolatów
Izolat od dziecka i czterech izolatów od bydła poddano selekcji serotypowej w CDC i stwierdzono, że jest odmianą S. enterica serotyp typhimurium Copenhagen. Wszystkie pięć izolatów miało ten sam wzór lizy fagowej, który nie pasował do wcześniej opisanych oznaczeń typu. Testy wrażliwości wykazały, że izolat z izolatu dziecka i bydła miał identyczny wzór, w tym oporność na ceftriakson (minimalne stężenie hamujące, .64 .g ceftriaksonu na mililitr) i ceftiofur (minimalne stężenie hamujące, .16 .g ceftiofuru na mililitr) . Chociaż pozostałe trzy izolaty bydła nie były oporne na ceftriakson lub ceftiofur, były oporne na pięć środków przeciwdrobnoustrojowych (ampicylinę, tetracyklinę, kanamycynę, streptomycynę i sulfizoksazol). Testy podwójnej dyfuzji dyskowej wykazały, że .-laktamaza, która nadawała oporność na ceftriakson i inne cefalosporyny o rozszerzonym spektrum działania, nie była hamowana przez klawulanian inhibitora .-laktamazy i dlatego nie była fenotypowo klasyfikowana jako .-laktamazy o rozszerzonym spektrum działania (grupa funkcyjna 2be ) .13
PFGE
Rysunek 1. Rycina 1. Wyniki elektroforezy w żelu pulsującym pola izolatów Salmonella enterica Serotyp Typhimurium od 12-letniego chłopca i bydła. Ścieżki i 2 przedstawiają szczepy kontrolne serotypu typhimurium S. enterica (odpowiednio REF42 i REF65), ścieżki 3 i 4 S. typica serotyp typhimurium, ostateczny fag typ 104 (DT104), ścieżka 5 izolat od dziecka, ścieżka 6 izolat bydła 2, ścieżka 7 izolat bydła 3, ścieżka 8 izolat bydła 4 i ścieżka 9 izolat bydła 1
[podobne: indeks bispektralny, riwaroksaban, stosunek albumin do globulin ]
[więcej w: olx mogilno, badanie densytometryczne, astygmatyzm objawy ]