Infekcja Salmonella odporna na ceftriakson pozyskiwany przez dziecko z bydła ad 6

W panelu A zespół I znaleziono tylko w opornych na ceftriakson izolatach i ich transkoniugantach opornych na ceftriakson. W panelu B analiza Southern blot z produktem PCR cmy-2 jako sondy wskazuje, że prążek I ma pochodzenie plazmidu i odpowiada plazmidowi 160 kb pokazanemu na fig. 2. Nie ma hybrydyzacji w izolacie bydlęcego wrażliwego na ceftriakson 2. Aby dowieść, że .-laktamaza podobna do AmpC została zakodowana w plazmidzie o wielkości 160 kb, który został znaleziony tylko w izolacie dziecka, izolat bydła i ich transkoniuganty, produkty PCR C. freundii podobne do ampC zostały oznaczone i użyte jako sondy. Analiza Southern blot żelu PFGE (Figura 3) wykazała, że sonda .-laktamazowa podobna do AmpC hybrydyzowała z pasmem I, którą znaleziono tylko w opornym na ceftriakson izolacie od dziecka, izolacie bydła i ich transkoniugantach. Ponieważ badania transkoniugacji wykazały, że beta-laktamaza podobna do AmpC pochodzi z plazmidu, doszliśmy do wniosku, że dodatkowym prążkiem I był unikalny plazmid 160 kb, który znaleziono w opornych na ceftriakson izolatach.
Rycina 4. Rycina 4. Wyniki elektroforezy w żelu pulsującym pola izolatów Salmonella enterica Serotyp Typhimurium od 12-letniego chłopca i bydła oraz transkoniugantów. W każdym panelu na ścieżce pokazano izolat bydlęcy 2, pasmo 2 izolat bydlęcia 1, izolat ścieżki 3 od dziecka, pasmo 4 transkoniugant Escherichia coli oporny na ceftriakson coli C600N i izolat od dziecka i pasmo 5 transkoniugant oporny na ceftriakson E. coli C600N i izolat bydła 1. Panel A pokazuje pasmo K, a panel B pokazuje wyniki hybrydyzacji typu Southerna z produktem PCR TEM2 o wielkości 952 bp amplifikowanym z izolatu od dziecka. Wyniki wskazują, że prążek K ma pochodzenie plazmidu i koduje .-laktamazę TEM-1. Dodatkowe pasma na ścieżkach i 2 w Panelu B mogą wskazywać podarte lub superskręcane formy plazmidów, które kodują TEM-1. Nie było hybrydyzacji sondy TEM-1 w transkoniugantach opornych na ceftriakson (ścieżki 4 i 5).
Analiza Southern blot wykazała, że .-laktamaza TEM-1 została zakodowana na plazmidach we wszystkich klinicznych izolatach, a nie na chromosomie (dane nie przedstawione). Ta analiza wykazała, że TEM-1 był kodowany na plazmidzie o długości 125 kb w izolacie z izolatu 3 bydła i bydła 3 oraz z plazmidu o masie cząsteczkowej 140 kb w izolatach bydlęcych 1, 2 i 4, podnosząc możliwość uzyskania pasma K z plazmidu. Aby odpowiedzieć na to pytanie, zhybrydyzowaliśmy DNA, który został oddzielony przez PFGE, za pomocą sondy TEM-1 (rysunek 4). Wyniki te pokazały, że prążek K pochodzi z plazmidu i reprezentuje plazmid o długości 125 kb znajdujący się zarówno w izolacie z izolatu 3 bydła i bydła, jak i plazmidu o masie cząsteczkowej 140 kb znajdowanego w izolatach bydła 1, 2 i 4.
W celu określenia, czy plazmid o długości 55 kb, który został znaleziony w izolacie od dziecka, stanowił prążek P zidentyfikowany w analizie PFGE, plazmidowy DNA i chromosomalny DNA trawiony XbaI poddano elektroforezie na tym samym żelu. Analiza wykazała, że prążek P był tej samej wielkości co plazmid.
Sekwencjonowanie DNA
AmpC-podobna .-laktamaza z opornego na ceftriakson transkoniuganta E. coli C600N i izolat od dziecka została całkowicie zsekwencjonowana i stwierdzono, że jest w 100% homologiczna do plazmidowej cefamycynazy CMY-2,33
Dyskusja
Na podstawie raportów przesłanych do CDC uważamy, że ta sprawa stanowi pierwszą udokumentowaną w Stanach Zjednoczonych nabytą w warunkach domowych infekcję salmonellą oporną na ceftriakson w Stanach Zjednoczonych.
[więcej w: riwaroksaban, zespół aktywacji makrofagów, przewód żylny ]
[patrz też: ile trwa leczenie kanałowe, aborcja farmakologiczna, anaplazmoza ]