Infekcja Salmonella odporna na ceftriakson pozyskiwany przez dziecko z bydła ad 5

Dwa odporne na ceftriakson szczepy (ścieżki i 2 na Figurze 2A) miały prążki plazmidowe o wielkości 160 kb. Izolat od dziecka zawierał dwa dodatkowe plazmidy, jeden z 55 kb i jeden z 125 kb. Pasmo 125 kb było również obecne w izolatach bydła 2 i 3 (ścieżki 3 i 4, odpowiednio, na Figurze 2A) i izolacie bydła 4 (dane nie pokazane). Pasma plazmidu o masie ciała 140 kb zaobserwowano w izolatach bydła i 2 (Figura 2A). Profile plazmidów izolatów bydlęcych 2 i 4 były nierozróżnialne (dane nie przedstawione). Porównywano profile plazmidowe izolatów salmonelli i transkoniugaty C600N E. coli uzyskane w wyniku transkoniugacji z izolatem z izolatu dziecka i bydła. Transkoniugatory oporne na ceftriakson zawierały prążek 160 kb, który znaleziono w izolacie bydlęcej i izolacie od dziecka (Figura 2B), ale nie pasma 55 kb i 125 kb, które znaleziono w izolacie od dziecka lub pasmo 140 kb, które znaleziono w izolacie bydła 1.
Analiza .-laktamazy
Ogniskowanie izoelektryczne przeprowadzono dla scharakteryzowania .-laktamaz obecnych w pięciu izolatach salmonelli i transkoniugantach opornych na ceftriakson. Wszystkie izolaty bydła 2, 3 i 4 wyrażały jedną .-laktamazę z punktem izoelektrycznym o wartości 5,4. To odkrycie, w połączeniu z ich profilem oporności na antybiotyki, sugerowało, że te izolaty wytwarzały .-laktamazę podobną do TEM-1. Izolat z izolatu dziecka i bydła wytwarzał nie tylko .-laktamazę podobną do TEM-1, ale także jedną z punktem izoelektrycznym co najmniej 9,0, co sugeruje enzym podobny do AmpC. Ponadto, wszystkie cztery transkoniuganty oporne na ceftriakson zawierały podobną do AmpC .-laktamazę (punkt izoelektryczny, .9.0), co dodatkowo sugeruje, że ta .-laktamazy była odpowiedzialna za oporność na ceftriakson i że była kodowana na skoniugowanym plazmidzie około 160 kb. . P-laktamaza podobna do TEM-1 nie była obecna w transkoniugantach.
Konkretne startery dla genu ampC z C. freundii zastosowano do scharakteryzowania .-laktamazy podobnej do AmpC znajdującej się w izolacie od dziecka, izolatu bydła i ich transkoniugantów. Ta analiza dała produkt PCR o oczekiwanej wielkości (631 bp) z izolatu od dziecka, izolatu bydła i ich transkoniugantów. Izolaty bydła 2, 3 i 4 były ujemne w teście PCR dla amplikonu o wielkości 631 bp. Odkrycia te wskazują, że .-laktamaza (punkt izoelektryczny, .9.0) blisko spokrewniona z genem ampC C. freundii była odpowiedzialna za oporność tych ceftriaksonów na ceftriakson.
Aby scharakteryzować .-laktamazę o punkcie izoelektrycznym 5.4, która była obecna we wszystkich izolatach salmonelli, zastosowano startery specyficzne dla rodziny .-laktamaz TEM. Wszystkie izolaty były pozytywne, ale transkoniuganty były ujemne. To odkrycie wykazało, że .-laktamaza podobna do TEM-1 nie była kodowana w tym samym plazmidzie co .-laktamaza podobna do AmpC.
Rycina 3. Rycina 3. Wyniki elektroforezy w żelu pulsującym pola izolatów Salmonella enterica Serotyp Typhimurium od 12-letniego chłopca i bydła oraz transkoniugantów. W każdym panelu na ścieżce pokazano izolat bydlęcy 2, ścieżkę 2 izolat od dziecka i ścieżki 3 i 4 transskoniugant Escherichia coli C600N oporny na ceftriakson z izolatem odpowiednio z izolatu dla bydła i bydła 1
[więcej w: tętnica zasłonowa, bostonka okres zarażania, zastawka eustachiusza ]
[przypisy: neurolog szczecinek, oddychanie podczas biegu, odczyn tuberkulinowy ]